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重组人甲状旁腺激素和人表皮生长因子融合肽制备技术

  甲状旁腺激素(PTH)和表皮生长因子(EGF)是人体内两大重要细胞因子。PTH能增加细胞膜EGF受体数目,加强EGF活性,二者能协同发挥骨吸收效应。重组人表皮生长因子,是人生长因子中的一种,作为一种强有力的细胞分裂因子,具有多种生物活性。另外,生物制药存在周期长、投资高、风险大等方面的问题。我们设计的融合肽PTH-EGF就相应地降低了单独生产一种生物制品的成本,也缩小了投资的风险,建立了制备生物药物的经济方法。
   大连化学物理研究所生物质高效转化研究组建立了PTH-EGF融合肽制备技术。将含有PTH-EGF融合基因的工程菌经IPTG诱导,融合肽GST-PTH-EGF以包涵体的形式在工程菌内高效表达。包涵体复性后,经过镍亲和层析得到高纯度融合肽GST-PTH-EGF,经过肠激酶酶切后,再用镍亲和层析纯化到融合肽PTH-EGF。经SDS-PAGE电泳分析,纯度大于95%。产品的PTH比活大于1.6×104 U/mg,EGF比活大于7.5×105 U/mg,同时具有两种细胞因子的活性,但毒副作用明显降低。
   骨质疏松已被国际卫生组织列为21世纪危害人类的四大疾病之一。PTH和EGF能协同发挥骨吸收效应,用于治疗骨质疏松症。我国现患有骨质疏松者高达6000万人,却没有合适的药物可以选择。在医药和临床上,EGF的前景非常广阔,EGF能促进表皮细胞的生长,加快愈合,对烧伤、烫伤、角膜溃疡、胃溃疡、脉管炎、坏疽病有显著疗效,每年需用量约150克左右。另外,EGF能促进表皮细胞的产生,使皮肤光柔滑润,可用于化妆品。所以,国内PTH-EGF的市场空间很大。